對象與方法

*（GnRH-ant，Merck，德國），人絕經(jīng)期尿*（human menopausal gonadotropin，HMG，麗珠醫(yī)藥集團股份有限公司），人絨毛膜*（human chorionic gonadotropin，HCG，麗珠醫(yī)藥集團股份有限公司）。胞內(nèi)染色試劑盒（BioLegend，美國），Annexin Ⅴ染色試劑盒 [ 賽默飛世爾科技（中國）有限公司 ]。5- 溴脫氧*核苷（5-bromodexyuirdine，BrdU，Sigma，美國），Ⅳ型膠原酶（Sigma，美國）。搖床（海門市其林貝爾儀器制造有限公司），低溫離心機（Eppendorf，德國），流式細胞儀（BD，美國）。使用眼科剪將收集的小鼠子宮碎至約 1 mm3 碎塊，經(jīng)Ⅳ型膠原酶消化后加入含 5% 胎牛血清培養(yǎng)液終止消化。

結(jié)果

以 CD45、CD3 和 NK1.1 標(biāo)記小鼠 uNK 細胞后，采用熒光標(biāo)記的磷脂結(jié)合蛋白 Annexin Ⅴ染色，并用流式細胞術(shù)檢測 GnRH-ant 對 uNK 細胞凋亡的影響。結(jié)果顯示，與對照組相比，GnRH-ant 組小鼠 uNK 細胞凋亡水平下降（P=0.004）。Pf 和 Gz-B 是 NK 細胞發(fā)揮毒性作用的主要細胞因子，本研究對小鼠 uNK 細胞內(nèi)的這 2 個因子的表達水平進行分析，結(jié)果顯示，與對照組相比，GnRH-ant組小鼠 uNK 細胞內(nèi) Pf（P=0.000）和 Gz-B（P=0.034）的表達水平均較高。近年來，GnRH-ant 方案憑借其簡便、靈活、安全、有效等優(yōu)勢在輔助生殖領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用，但 GnRH-ant對內(nèi)膜容受性的不利影響使得該方案的胚胎種植率及臨床妊娠率偏低 。與自然周期方案組相比，GnRH-ant 方案組子宮內(nèi)膜中多種與細胞黏附、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及 T 細胞受體信號通路相關(guān)的基因表達發(fā)生了顯著變化

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