認(rèn)識(shí)還比較膚淺，本文對(duì)液相色譜儀法測(cè)定酸性橙Ⅱ和酸性金黃進(jìn)行了初步探討。此方法還有待進(jìn)一步完善。

豆制品中酸性金黃Ⅱ經(jīng)粉碎，［摘要］本文探討液相色譜法測(cè)定豆制品中酸性橙Ⅱ和酸性金黃含量的方法。提取，過(guò)濾，得到樣品提取液用液相色譜測(cè)定，流動(dòng)相是甲醇乙酸銨0.02mol/L=75+25檢測(cè)波長(zhǎng)450nm時(shí)，流速1.0ml/min測(cè)定，色譜柱為SymmetryC18250mm4.6mmid5μm

［關(guān)鍵詞］豆制品；酸性金黃Ⅱ；液相色譜

木制家具、毛線、布料等的著色劑，豆制品中酸性橙Ⅱ和酸性金黃是醫(yī)學(xué)中應(yīng)用于組織染色。但不法商販利用其顏色鮮艷、著色穩(wěn)定、價(jià)廉的特點(diǎn)非法添加于豆制品中，嚴(yán)重危害了廣大消費(fèi)者的身體健康，國(guó)家尚無(wú)相應(yīng)的檢驗(yàn)規(guī)范方法，本文初步建立了用液相色譜法測(cè)定酸性橙Ⅱ和酸性金黃的方法，該方法能快速、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便的檢出酸性橙Ⅱ和酸性金黃，能滿足食品檢驗(yàn)的需要。

1試驗(yàn)局部

1.1儀器和試劑

1.1.1儀器

2487型紫外檢測(cè)器，液相色譜儀包括Waters1525型泵。Breez色譜工作站及手動(dòng)進(jìn)樣器。

1.1.2規(guī)范品

酸性橙Ⅱ（純度86%和酸性金黃（工業(yè)用純度90%

1.1.3甲醇

色譜純。

1.1.4超純水

由AKUPⅡI20型超純水機(jī)提供的高純水。

pH=4.7 1.1.50.02mol/L乙酸銨溶液。

1.1.6堿性提取液

無(wú)水乙醇∶氨水∶水=70∶20∶10

1.2色譜條件

檢測(cè)波長(zhǎng)450nm進(jìn)樣量20μl 液相色譜柱為SymmetryC18250mm4.6mmid5μm流動(dòng)相甲醇：0.02mol/L乙酸銨溶液=75+25溶液流速1.0ml/min柱溫為常溫。

1.3規(guī)范品的制備

配成系列濃度為00.01μg/ml0.05μg/ml0.10μg/ml0.50μg/ml1.00μg/ml規(guī)范系列。吸取混合規(guī)范貯藏液1.00mg/ml適量。

1.4樣品前處理

加pH=6水50ml混勻，稱取混勻粉碎的樣品5.00g~10.00g于100ml燒杯。過(guò)濾，濾液加入1.00g聚酰胺粉用，G3漏斗抽濾，pH=6水沖洗2次~3次，堿性提取液解吸2次~3次，每次5ml收集解吸液，水浴揮干，將殘?jiān)谜麴s水溶解，定容至5ml然后過(guò)0.45μm濾膜。規(guī)范和樣品濾液注入HPLC系統(tǒng)，按上述色譜條件測(cè)定。以保管時(shí)間定性，峰面積定量。

2結(jié)果

2.1波長(zhǎng)選定

進(jìn)行紫外掃描，用流動(dòng)相稀釋規(guī)范溶液。由掃描圖譜可知，酸性Ⅱ和酸性金黃在450nm有較大吸收，所以我選取450nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。

2.2工作曲線與檢測(cè)限

其結(jié)果表明，以工作液含量X對(duì)色譜峰面積Y進(jìn)行線形回歸。酸性橙Ⅱ和酸性金黃在0.11μg/ml~1.00μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系（Linearrang良好?；貧w方程（Regressionequ線性范圍，相關(guān)系數(shù)（Correlationcoeffici及檢測(cè)限（DetectionlimitS/N=3見(jiàn)表1表1規(guī)范曲線及檢出限項(xiàng)目。

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