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卡氏肺孢子蟲病實驗室診斷與結(jié)果分析

來源:上海金穗生物科技有限公司   2012年09月27日 09:03  

肺孢子蟲?。╬neumocystosis)是由卡氏肺孢子蟲(pneumocysis carinii)引起的肺臟機會感染性原蟲病。該病多發(fā)生在體弱兒童和免疫缺陷者。隨著器官移植、腫瘤化學(xué)藥物治療等免疫抑制藥的廣泛使用,尤其近年來艾滋病蔓延,使本病發(fā)病率明顯提高,并成為艾滋病死亡的重要原因。

 
    [病因?qū)W]  肺孢子蟲為原蟲,有包囊和滋養(yǎng)體。包囊從呼吸道進入肺臟,黏附在人體肺泡上皮細(xì)胞表面寄生。當(dāng)宿主免疫功能低下時,蟲體大量繁殖,引起肺泡上皮細(xì)胞炎癥,肺泡壁明顯增厚,大量泡沫樣炎性滲出液和成團的肺孢子蟲充滿肺泡、甚至細(xì)小支氣管,阻礙肺部氣體交換,導(dǎo)致呼吸衰竭。肺孢子蟲病通常于肺臟。
 
    [實驗室診斷]
    特異性檢查
    (1)分泌物涂片檢查。
    (2)血清學(xué)檢查。
    (3)分子生物學(xué)診斷。
 
    [結(jié)果分析與判斷]
    1.分泌物涂片檢查  收集痰液或支氣管分泌物涂片,染色后光學(xué)顯微鏡檢查;也可用10mol/LNaOH處理,再涂片染色光學(xué)顯微鏡檢查。目前有多種染色方法可供選擇:*銀染法,可見包囊壁呈棕褐色,并有特征性括弧樣結(jié)構(gòu),該法敏感性可達50%一60%;甲胺藍(lán)染色法、革—魏染色法都可用于查找包囊,但也可使真菌著色,從而導(dǎo)致與真菌混淆;姬姆薩、*染色法均可用于檢查滋養(yǎng)體及包囊。近年來,藻紅B染色、熒光標(biāo)記的單克隆抗體染色的應(yīng)用,進一步提高了檢測方法的敏感性和檢出率。必要時也可進行經(jīng)皮穿刺肺活體組織學(xué)檢查、*肺活體組織學(xué)檢查或開胸肺活體組織學(xué)檢查,這些方法雖可靠,但損傷大。
    2.血清學(xué)檢查  常用方法為IFA、ELISA或補體結(jié)合試驗。但由于大多數(shù)正常人都曾有過肺孢子蟲隱性感染,血清中都有特異性抗體存在,故檢測血清抗體的方法一般不用于肺孢子蟲病的診斷。
    3.分子生物學(xué)診斷  以卡氏肺孢子蟲的DNA 片段作為探針,對檢測標(biāo)本中卡氏肺孢子蟲進行分子雜交檢測。也可利用卡氏肺孢子蟲DNA序列,設(shè)計核苷酸序列特異性引物,對卡氏肺孢子蟲DNA進行體外擴增,可以大大提高卡氏肺孢子蟲檢測的靈敏度,并逐漸成為卡氏肺孢子蟲病原體檢測的重要技術(shù)和方法。

 

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